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HRP-CHO|辣根過氧化物酶-醛基的描述

2025-02-24 [174]

辣根過氧化物酶-醛基(HRP-CHO)是一種將醛基(-CHO)與辣根過氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP)結合的化合物,以下是其詳細介紹:

結構特點

辣根過氧化物酶是一種含四個二硫鍵的單鏈多肽,由無色的酶蛋白和棕色的鐵卟啉結合而成的糖蛋白,含18%碳水化合物。醛基通過與HRP分子中的特定基團反應而結合,形成HRP-CHO復合物。

制備方法

  • 高碘酸鹽氧化法:將HRP溶解在適當的緩沖液中,加入高碘酸鈉溶液,在低溫下反應一定時間,使HRP的糖基被氧化成醛基,然后通過透析或其他純化方法去除未反應的高碘酸鈉和其他雜質,得到HRP-CHO。

  • 試劑盒法:如Abbkine的LliKine™辣根過氧化物酶(HRP)偶聯試劑盒,提供了一種簡單快速的方案,將HRP直接偶聯到含有自由氨基的蛋白質、多肽或其他配體上。

功能特性

  • 催化活性:HRP-CHO保留了辣根過氧化物酶的催化能力,能夠催化多種底物的氧化反應,如在過氧化氫存在下,催化底物產生顏色變化或化學發光信號。

  • 反應性基團:醛基作為反應性基團,能夠與氨基酸、蛋白質或其他生物分子中的氨基發生反應,形成穩定的共價結合,可用于標記抗體、蛋白質或其他生物分子,實現信號放大和檢測。

應用領域

  • 免疫檢測:在酶聯免疫吸附測定(ELISA)、免疫印跡(Western blot)、免疫組化等實驗中,HRP-CHO可作為標記酶,與抗體結合,用于檢測抗原或抗體的存在和含量。

  • 生物傳感器:可用于構建生物傳感器,通過與目標生物分子結合,產生可檢測的信號變化,用于檢測生物分子、藥物和環境污染物等。

  • 化學合成:醛基可以參與多種化學反應,如縮合反應和還原反應,為藥物合成和材料科學提供多種合成路徑。

注意事項

  • 保存條件:HRP-CHO應在冷藏條件下(-20℃)保存,以保持其活性和穩定性。

  • 使用前處理:使用前需根據具體實驗要求進行適當的處理,如溶解、稀釋等,并注意避免反復凍融。

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